分光光度計(jì)的帶寬（bandwidth）很大程度上依賴于單色儀的狹縫的寬度。可以投射出實(shí)驗(yàn)要求的光譜。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測量。可變的單色儀的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿足多種實(shí)驗(yàn)需要。
分光光度計(jì)是精密儀器，正確安裝、使用和保養(yǎng)對保持儀器良好的性能和保證測試的準(zhǔn)確度有重要作用。
1.對儀器工作環(huán)境的要求
分光光度計(jì)應(yīng)安裝在穩(wěn)定的工作臺(tái)上，(周圍不應(yīng)有強(qiáng)磁場, 以防電磁干擾)，室內(nèi)溫度應(yīng)保持在(10～30)℃。室內(nèi)應(yīng)干燥，相對濕度宜控制在<85 %，室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體，光線不宜過強(qiáng)。
2.儀器保養(yǎng)和維護(hù)方法
(1)儀器工作電壓一般為220V，允許±10 %的電壓波動(dòng)。為保持光源燈和檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性，在電源電壓波動(dòng)較大的實(shí)驗(yàn)室配備穩(wěn)壓器。
(2)為了延長光源使用壽命，在不用時(shí)不用開光源燈。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定，應(yīng)及時(shí)更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置，不要用手直接接觸窗口或燈泡，避免油污沾附，若不小心接觸過，要用無水乙醇擦拭。
(3)單色器是儀器的核心部分，裝在密封盒內(nèi)，不能拆開，為防止色散元件受潮發(fā)霉，必須經(jīng)常更換干燥劑。
(4)必須正確使用吸收池，保護(hù)吸收池光學(xué)面。
(5)光電轉(zhuǎn)換元件不能長時(shí)間曝光，應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。
分光光度計(jì)的檢驗(yàn)小妙招
1.波長準(zhǔn)確度的檢驗(yàn)：
分光光度計(jì)在使用過程中，由于機(jī)械振動(dòng)、溫度變化、燈絲變形、燈座松動(dòng)或更換燈泡等原因，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)刻度盤上的讀數(shù)與實(shí)際通過溶液的波長不符合的現(xiàn)象，
因而導(dǎo)致儀器靈明度降低，影響測定結(jié)果的精度，需要進(jìn)行檢驗(yàn)。
檢驗(yàn)波長準(zhǔn)確度簡單的方法是用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值, 如果測出的值與濾光片標(biāo)準(zhǔn)值之差超出規(guī)程規(guī)定, 則需要進(jìn)行波長調(diào)節(jié)。
2.透射比正確度的檢驗(yàn)：
用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10 %、20 %、30 %左右的光譜中性濾光片，可見光區(qū)分別在440、546、635nm波長處，以空氣為參比，分別測量各濾光片的透射比，紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235、257、313、350nm波長處，以高氯酸溶液為參比，測量其透射比。
3.穩(wěn)定度的檢驗(yàn)：
在零點(diǎn)不受光的條件下，用零點(diǎn)調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零點(diǎn)，觀察3分鐘讀取透射比的變化，即為零點(diǎn)穩(wěn)定性。在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm處，調(diào)節(jié)零點(diǎn)后，蓋上樣品室蓋(打開光門)，使光電管受光，調(diào)節(jié)透射比為95%（數(shù)顯儀器調(diào)至100%）察3分鐘讀取透射比的變化，為光電流穩(wěn)定性。
4.光的檢驗(yàn)：
可見分光計(jì)棱鏡式儀器在420nm處，光柵式儀器在360nm處，紫外分光計(jì)在220nm處分別用符合規(guī)定的截止濾光片，以空氣為參比，測量其透射比值，即為儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率。
為了測量吸光值，分光光度計(jì)制造商通常使用光電倍增管（photo-multiplier tubes，PMTs）和光敏二極管。提供快速的反應(yīng)時(shí)間和良好的靈敏度，并且可以在紫外光譜調(diào)節(jié)至特定的范圍。但一些制造商依賴于光敏二極管的動(dòng)態(tài)范圍在數(shù)秒內(nèi)行使所有的光譜測量。
更新時(shí)間：2021-01-04
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